智能細(xì)胞株篩選系統(tǒng)有什么好處?
點(diǎn)擊次數(shù):884 更新時(shí)間:2023-01-18
智能細(xì)胞株篩選系統(tǒng)主要是用來(lái)篩選那些不表達(dá)特定蛋白的細(xì)胞株,這個(gè)系統(tǒng)需要專門(mén)的培養(yǎng)皿,在使用中如果沒(méi)有合適的培養(yǎng)液,培養(yǎng)過(guò)程就會(huì)出現(xiàn)很多的問(wèn)題。我們可以用液氮作為培養(yǎng)液,但是液氮需要冷凍,保存溫度不能太低也不能太高。如果使用-80度左右就可以了。
將培養(yǎng)中的單個(gè)或多個(gè)細(xì)胞懸浮于無(wú)菌液體中形成懸浮液,加入生長(zhǎng)因子和抗菌藥物后進(jìn)行培養(yǎng)。待生長(zhǎng)因子濃度達(dá)到一定程度后,我們將其進(jìn)行離心分離。然后在液氮中進(jìn)行冷凍干燥后保存:(-80度)-30min使用智能細(xì)胞株篩選系統(tǒng)來(lái)篩選細(xì)胞株。其中一些細(xì)胞株可以在培養(yǎng)液中穩(wěn)定生長(zhǎng)過(guò)一年!
1、用于誘導(dǎo)表達(dá):將經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)的細(xì)胞用含有藥物的培養(yǎng)液和含有其它不同類型藥物的培養(yǎng)液連續(xù)培養(yǎng)7天以上,然后收集所有細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)(以單克隆或群體計(jì)數(shù))。
2、用于分泌蛋白篩選:將通過(guò)誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的可在血清中穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白或mRNA的細(xì)胞分離提取純化得到抗體后分離,然后用含有抗菌藥物L(fēng)-巖藻糖苷酸(LTA)和其它各種不同抗菌藥物成分濃度為500μg/ml、30000μg/ml和30000nM的處理后進(jìn)行離心得到粗蛋白(>20kDa)后離心提取總蛋白表達(dá)分析,篩選可表達(dá)目的蛋白或mRNA。